关键词:基因组DNA提取技术服务|实验技术服务 简介:世界**品牌基因组DNA提取技术服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。 基因组DNA提取技术服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。 我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。 产品品牌:基因组DNA提取技术服务|实验技术服务 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html 测序实验流程: DNA提取试剂盒是根据氯化芐法构建的,能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。氯化苄具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化,从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了氯化苄的这一特性,将植物样品冻结融解后,再使用Pipet Tip的**将植物样品在Microtube壁上数次按压即可破坏细胞壁。 保存方式 室温。低温保存可能会有沉淀析出。如果发生析出现象,请于50℃溶解后,再于室温保存。 操作方法 全套操作约需1小时,分匀浆、细胞裂解、除蛋白、DNA纯化等步骤,详细说明如下。 一. 匀浆和细胞裂解。 使用不同的实验材料需采用不同的匀浆步骤,具体说明如下: 【从动物组织中提取基因组DNA】 使用研钵进行匀浆时: ① 取1~100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的研钵中,快速用力展研成匀浆。 注)下列组织请加液氮研磨至粉末状。 A.富含DNA酶的胰脏、脾脏、胸腺、淋巴等组织。 B.富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等组织。 C.富含角质蛋白的组织或坚硬的组织(如骨骼)等。 ② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,温和研磨30秒钟。 注)使用上述①-注)的实验材料时,请在加入Solution A及RNase A1后,将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。 ③ 收集650 μl研磨好的组织匀浆液移至Collection Tube中。如果匀浆体积不足650 μl,请补充Solution A至650 μl,65℃保温5分钟。 二.使用研磨棒进行匀浆时: ① 取1~100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的Collection Tube 中,用研磨棒快速研磨成糊状。 ② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成匀浆。 ③ 加入350 μl的Solution A将研磨棒上的匀浆冲入Collection Tube中,充分振荡混合后,65℃保温5分钟。 三.使用悬浮培养的动物细胞时: ① 使用Collection Tube收集1×105~1.5×107的细胞悬浮液,5,000 rpm离心5分钟,弃上清(细胞培养液)。 ② 加入150 μl的灭菌蒸馏水或PBS悬浮细胞。 ③ 加入500 μl的Solution A和0.8 μl的RNase A1,激烈振荡15秒钟,然后室温静置1分钟。 四.使用贴壁细胞时: ① 弃尽培养液,向培养皿中加入650 μl的Solution A,室温静置1分钟。 注)96孔板等的每个孔中一次容纳不了650 μl 溶液时,请分数次处理细胞。 ② 用移液枪的枪头吹落贴壁培养细胞,取650 μl的细胞悬浮液转移至Collection Tube中。 ③ 加入0.8 μl的RNase A1,激烈振荡15秒钟,然后室温静置1分钟。上一篇:基于慢病毒载体的miRNA载体构建服务|实验技术服务下一篇:基因组文库(Genomic Library)构建|实验技术服务
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