关键词:抗体定制技术服务|实验技术服务 简介:世界**品牌抗体定制技术服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。 抗体定制技术服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。 我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。 产品品牌:抗体定制技术服务|实验技术服务 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html 测序实验流程: 抗体检测服务 ELISA(酶联免疫吸附实验) Dot Blot(斑点印迹实验) Western Blot(免疫印迹实验) IHC (免疫组织化学实验) 抗体标记服务 HRP(辣根过氧化物酶) Biotin(生物素) 操作方法 ⑴准备好脾细胞。 ⑵在50ml沉淀管中混合108脾细胞和107小鼠骨髓瘤细胞,并加入50ml2.5%FCS-1640液。 ⑶室温400g离心3min,使细胞沉淀。 ⑷移去上清液。 ⑸轻敲管底部,使沉淀流动,把沉淀管放于40℃水浴中,使其达融合温度。 ⑹加预热至40℃的50%PEG0.8ml,用1ml吸管缓慢滴加,边加边摇沉淀管,肉眼观察可见有颗粒出现,滴加过程要求持续2min。 ⑺加1ml1640液,边加边摇动,持续1min。 ⑻重复⑺一次。 ⑼加1ml1640液,边加边摇动,持续0.5min。 ⑽重复⑼一次。 ⑾加1640液15ml。 ⑿室温,400g离心1min,使细胞沉淀。 ⒀去上清,轻敲管底部,加25ml含有HAT的完全1640液。 ⒁往已于前一日种有饲养细胞的40孔塑料培养盘中滴加融合的细胞液,每孔1滴(约0.05ml)。 ⒂轻摇后,放入5%CO2饱和湿度的37℃温箱中培育。 ⒃第3、6、9、10日换入含HAT的完全1640培养液。注意轻轻吸取上清液,勿将固定于孔底的细胞吸出,根据需要加入适量的饲养细胞。 ⒄于第12、15日加入含有HAT的完全1640培养液。在每次换液前用倒置显微镜观察,大约在10天左右就可观察到杂交瘤细胞生长出来。大多数杂交瘤细胞在10~20天内出现,但也有在1个月左右才能出现的。杂交瘤细胞出现后,吸取上清液,检查抗体。 ⒅对继续生长的杂交瘤细胞进行增殖传代。在传代过程中,依情况取消HAT液和完全1640液而代之以10%FCS-1640液。同时保存于液氮和进行克隆化,在这期间每代都要检查抗体,以防止产生抗体细胞的变异和丢失。上一篇:流式分选实验|实验技术服务下一篇:抗体制备|实验技术服务
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