【流式抗體PI/RNAse】FCM,流式抗體,超過科研的質檢 西班牙Immunostep
【流式抗體PI/RNAse】FCM,流式抗體,超過科研的質檢 西班牙Immunostep公司簡介
IMMUNOSTEP是一家擁有混合業務模式的公司,一方面開發,制造和銷售用于根據合同執行的研究和診斷以及其他開發服務的產品。
關于產品,該公司專注于流式細胞術中使用的試劑,試劑盒和設備的開發和商業化。這些產品用于研究和診斷。
公司在研發領域擁有非常接近市場的“管道”,解決了診斷領域的醫療需求,并獲得10項國際**的支持。
為加強我們對提供高質量產品的承諾,IMMUNOSTEP正在通過ISO 9001:2008和ISO 13845:2012認證的質量管理體系,該體系符合醫療器械和試劑制造的國際標準。
IMMUNOSTEP成立于2001年,位于薩拉曼卡(西班牙),薩拉曼卡大學科學園,西班牙歷史*悠久的大學,也是連續運營的第三古老的歐洲大學,在流量診斷服務和臨床研究Cytometry全球認可。
流式抗體(熒光抗體)細胞染色步驟 染色緩沖液 (BSA)的配制: PBS含有1% FBS和0.09% NaN3,置于冰上或4度冰箱備用。 準備單細胞懸液:淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。 用 冰染色緩沖液 洗細胞2次,離心細胞,用冰染色緩沖液重懸細胞,使終濃度為2×10 7 細胞/ml。 各取50ul(10 6 細胞)細胞懸液到2個圓底的Ep管中。 根據抗體說明書在其中1個Ep管中加入合適的抗體量,另外1個加入同型對照抗體,冰上避光孵育20分鐘(建議每5分鐘輕輕混勻,以免細胞沉積)。根據熒光抗體的親和力適當延長染色時間。 用1ml染色緩沖液洗2次去除未結合的抗體,300×g離心5分鐘,每次離心后小心吸取上清。 用適量染色緩沖液(如500ul)重懸細胞。 流式細胞儀分析染色結果(不超過4小時)。如果暫時無法檢測,也可以將染色后的細胞用4%多聚甲醛固定后,避光儲存在4度。固定后的細胞可以保存*多一個星期。
流式抗體(熒光抗體)細胞染色步驟
染色緩沖液 (BSA)的配制: PBS含有1% FBS和0.09% NaN3,置于冰上或4度冰箱備用。
準備單細胞懸液:淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。
用 冰染色緩沖液 洗細胞2次,離心細胞,用冰染色緩沖液重懸細胞,使終濃度為2×10 7 細胞/ml。
各取50ul(10 6 細胞)細胞懸液到2個圓底的Ep管中。
根據抗體說明書在其中1個Ep管中加入合適的抗體量,另外1個加入同型對照抗體,冰上避光孵育20分鐘(建議每5分鐘輕輕混勻,以免細胞沉積)。根據熒光抗體的親和力適當延長染色時間。
用1ml染色緩沖液洗2次去除未結合的抗體,300×g離心5分鐘,每次離心后小心吸取上清。
用適量染色緩沖液(如500ul)重懸細胞。
流式細胞儀分析染色結果(不超過4小時)。如果暫時無法檢測,也可以將染色后的細胞用4%多聚甲醛固定后,避光儲存在4度。固定后的細胞可以保存*多一個星期。
流式抗體CD45R中的R表示什么意思 通常抗體說明書上寫的是:每百萬個細胞加_____微升抗體,就是一個test, 仔細看說明書,寫得很詳細(至少BD ebioscience IMMUNOSTEP說明書都很詳細,別的不清楚)你的25test就是按照這個標準算可以做25個樣
流式抗體CD45R中的R表示什么意思
通常抗體說明書上寫的是:每百萬個細胞加_____微升抗體,就是一個test, 仔細看說明書,寫得很詳細(至少BD ebioscience IMMUNOSTEP說明書都很詳細,別的不清楚)你的25test就是按照這個標準算可以做25個樣
1、取一定體積的抗凝全血,(人100ul,小鼠取30~50ul)
2、加入適量的表面抗體,室溫孵育15min (抗體用量和孵育條件詳見抗體說明書)
3、按使用的溶血素說明裂解紅細胞后,加入1~2ml 流式染色緩沖液洗一次
4、300g離心5min 棄上清,用500ul流式染色緩沖液重懸
5、立即上機,如不能立即檢測,用0.5ml 0.1~4%多聚甲醛重懸,避光4℃保存24小時內上機分析
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