關鍵詞:細胞培養服務|實驗技術服務
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細胞培養服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
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測序實驗流程：
生存期
在細胞一代中，細胞能倍增3～6次，經歷三個階段：
1. 潛伏期(latent phase) ：
接種 經過 懸浮期(細胞質回縮,胞體呈圓球形) 貼壁。
初代培養細胞 經過 10～24小時或更多時間。
連續細胞系和癌細胞系 經過 10～30分鐘 貼附。
貼附現象是一個非常復雜和受多種因素的影響。
影響細胞貼附：底物表面不干凈，影響細胞貼附。
利于細胞貼附：底物表面帶有陽性物質與特殊物質:
纖粘連蛋白(fibronectin FN)、
細胞表面蛋白(cell surface proteinCSP)
這些物質有的存在與細胞表面,有的來自血清。
潛伏期特點：
長短與細胞接種密度、種類、使用的培養基性質有關。
(1)細胞貼附后進入潛伏期,細胞無增殖。少見分裂相，細胞有運動活動。
(2)初代培養 細胞潛伏期約為24～96小時或更長，
連續細胞系和腫瘤細胞潛伏期約6～24小時。
(3)細胞接種密度大潛伏期短。
(4)細胞出現分裂相增多時，標志細胞進入指數增生期。
實驗用品 
1. 種類︰ 
1.1. 細胞培養實驗用品均為無菌，除了玻璃容器與pasteur pipet 外，其它均為塑料無菌 
制品。 
1.2. TC 級培養盤表面均有coating 高分子物質以讓細胞吸附，培養容器種類有Tflask, 
plates, dishes, roller bottle 等，依實驗需要使用。 
1.3. plastic sterile pipet: 1 ml, 2 ml,5 ml, 10 ml, 25 ml 
1.4. 塑料離心管: 15 ml, 50 ml，均有2 種不同材質，其中polypropylene (PP) 為不透 
明材質，polystyrene (PS) 為透明材質，可依實驗需要而選擇適合材質之離心管。 
1.5. glass pastuer pipet: 9 inch，用以抽掉廢棄培養液等。 
1.6. 玻璃血清瓶(Pyrex or Duran glassware)：100 ml, 250 ml,500 ml,1000 ml 
2. 清洗︰ 
2.1. 新購玻璃血清瓶先以0.1~0.05 N HCl 浸泡數小時，洗凈后才開始使用。 
2.2. 用過之玻璃血清瓶，以高壓蒸汽滅菌，洗凈后分別用一次與二次去離子水沖洗干 
凈，勿加清潔劑清洗。 
3. 滅菌︰ 
3.1. 實驗用玻璃血清瓶以鋁箔紙包覆瓶蓋，高壓蒸汽滅菌121 oC, 15 lb, 20 分鐘，置于 
oven 中烘干。 
3.2. 實驗用玻璃pasteur pipet 以干熱滅菌170 oC, 4 小時。 
3.3. 液體或是固體廢棄物可用10 % hypochloride 溶液(次氯酸，即漂白水) 或是蒸汽高 
壓滅菌121 oC, 15 lb, 20 分鐘處理。