关键词:Transwell实验服务|实验技术服务 简介:世界**品牌Transwell实验服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。 Transwell实验服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。 我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。在获得重组蛋白产品的同时,我们也会提供相应的原始数据和原始图片,不需要再额外花费精力重复实验。另一方面,我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。 产品品牌:Transwell实验服务|实验技术服务 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html 测序实验流程: 细胞种在上室内,因聚碳酸酯膜有通透性,故可研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。 根据transwell的特点(孔径,膜),可进行如下方面研究: 1.共培养 孔径<3.0um 研究下室细胞B代谢物(分泌物)对上室细胞A的影响。 2.细胞趋化 孔径可选择5.0、8.0、12.0µm 研究进入下室的细胞量,反映下室成分对上室细胞的趋化能力 3.细胞迁移 孔径常选择8.0、12.0µm 研究进入下室的细胞量,反应上室细胞的迁移能力 4.细胞侵袭 孔径常选择8.0、12.0µm,膜上室侧铺有基质胶, 研究进入下室的细胞量,反映上室细胞的侵袭能力 一、肿瘤细胞侵袭实验(transwell) 原理: 模仿体内细胞外基质,细胞只有分泌基质金属蛋白酶(MMPs),降解基质胶才可进入下室。 步骤 1. Transwell小室准备 1)无基质胶Transwell小室制备 A. 包被基底膜: A. Matrigel (50mg/L)按1:8稀释,无血清培养基作为稀释液 B. 取适量加入Transwell小室中(24孔板transwell小室加100 ul),4℃操作。 C. 37℃培养箱中,孵育4-5h(>5h);出现“白色层”时,说明已经变为固态。 2)有基质胶Transwell小室制备 A. 小室放入培养板中,上室加入300µl预温的无血清培养基 B. 室温下静置15-30min,使基质胶再水化 C. 再吸去剩余培养液。 2.细胞悬液准备 1)消化、收集细胞; 2)PBS洗1-2次 3)用含BSA的无血清培养基重悬(细胞密度约在1-10×105/ml)。 3. 细胞接种 1)取适量细胞悬液加入Transwell小室(按transwell说明)。24孔板小室一般200µl。 2)24孔板下室一般加入500µl含FBS或趋化因子的培养基。注意避免气泡产生(下层培养液和小室间) 3) 培养细胞:常规培养12-48h(主要依癌细胞侵袭能力而定)。 4. 结果统计上一篇:SRB技术服务|实验技术服务下一篇:Southern Blot技术服务|实验技术服务
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