關鍵詞:Transwell實驗服務|實驗技術服務 簡介:世界**品牌Transwell實驗服務|實驗技術服務原裝**,質量保證,價格優惠。 Transwell實驗服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。 我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產品的同時,我們也會提供相應的原始數據和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面,我們所有的實驗數據真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。 產品品牌:Transwell實驗服務|實驗技術服務 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html 測序實驗流程: 細胞種在上室內,因聚碳酸酯膜有通透性,故可研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。 根據transwell的特點(孔徑,膜),可進行如下方面研究: 1.共培養 孔徑<3.0um 研究下室細胞B代謝物(分泌物)對上室細胞A的影響。 2.細胞趨化 孔徑可選擇5.0、8.0、12.0µm 研究進入下室的細胞量,反映下室成分對上室細胞的趨化能力 3.細胞遷移 孔徑常選擇8.0、12.0µm 研究進入下室的細胞量,反應上室細胞的遷移能力 4.細胞侵襲 孔徑常選擇8.0、12.0µm,膜上室側鋪有基質膠, 研究進入下室的細胞量,反映上室細胞的侵襲能力 一、腫瘤細胞侵襲實驗(transwell) 原理: 模仿體內細胞外基質,細胞只有分泌基質金屬蛋白酶(MMPs),降解基質膠才可進入下室。 步驟 1. Transwell小室準備 1)無基質膠Transwell小室制備 A. 包被基底膜: A. Matrigel (50mg/L)按1:8稀釋,無血清培養基作為稀釋液 B. 取適量加入Transwell小室中(24孔板transwell小室加100 ul),4℃操作。 C. 37℃培養箱中,孵育4-5h(>5h);出現“白色層”時,說明已經變為固態。 2)有基質膠Transwell小室制備 A. 小室放入培養板中,上室加入300µl預溫的無血清培養基 B. 室溫下靜置15-30min,使基質膠再水化 C. 再吸去剩余培養液。 2.細胞懸液準備 1)消化、收集細胞; 2)PBS洗1-2次 3)用含BSA的無血清培養基重懸(細胞密度約在1-10×105/ml)。 3. 細胞接種 1)取適量細胞懸液加入Transwell小室(按transwell說明)。24孔板小室一般200µl。 2)24孔板下室一般加入500µl含FBS或趨化因子的培養基。注意避免氣泡產生(下層培養液和小室間) 3) 培養細胞:常規培養12-48h(主要依癌細胞侵襲能力而定)。 4. 結果統計上一篇:SRB技術服務|實驗技術服務下一篇:Southern Blot技術服務|實驗技術服務
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