关键词:多克隆抗体制备技术服务|实验技术服务 简介:世界**品牌多克隆抗体制备技术服务|实验技术服务原装**,质量保证,价格优惠。 多克隆抗体制备技术服务|实验技术服务——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系。 我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。 产品品牌:多克隆抗体制备技术服务|实验技术服务 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html 测序实验流程: 血清的分离: 如果用三角瓶或平皿盛血,将器皿倾斜放置于37oC烘箱2hr,转移到4oC沉淀,**天早上用吸管吸取血清。如果用离心管收集,37oC烘箱放置2hr,转移到4oC沉淀,**天早上离心,10000RCF,10分钟。在血清中加入 NaN3 至终浓度0.02%,分装后-20oC保存。 抗血清收获后,加 1/万硫柳汞或 1/万的叠氮钠防腐,或加入等量的中性甘油,分装小瓶,置-20℃以下的低温保存,数月至数年内抗体效价无明显变化。注意避免反复冻融。也可将抗血清冷冻干燥后保存。 多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤: 1、制备抗原。 2、选择实验动物。 3、动物免疫。 4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。 5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。 6、纯化出抗体。 7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。 (一)抗原制备 Ig 是免疫球蛋白,对异种动物而言,是良好的抗原物质。可以刺激异种动物产生抗 Ig 血清, 经适当提取后,产生抗 Ig 抗体,又叫**抗体或抗抗体。在多数的间接标记反应中,均需制备 抗 Ig 抗体。 (二)材料与试剂 1.提取的动物 Ig 2.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂 3.青霉素和链霉素 4.实验动物 兔 5.其它材料及试剂 时间(天) 制备步骤 说明 1 初次免疫 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠,抗原与弗氏完全佐剂 14 **次免疫 抗原与水溶性佐剂 21 第三次免疫 抗原与水溶性佐剂 28 血清效价检测 间接ELISA检测血清效价,效价达>1:20000;抗血清效价>1:10000再次加强一次,效价<1:10000终止合同 30 加强免疫 单独抗原 三天后采血(血清做阳性对照),取脾 34 细胞融合 SP2/0骨髓瘤细胞与一只小鼠(ELISA效价较高)的脾细胞融合 44-56 HAT选择杂交瘤细胞 ELISA效价检测筛选阳性细胞克隆(一株) 60-70 细胞上清送检 2ml ELISA阳性细胞上清交客户检测,请在接到样品后1周之内回复 细胞冻存 待客户检测结果结束,确认1株细胞株进行后续的腹水制备 制备腹水并纯化 接种细胞制备腹水及腹水纯化(1株) *终提供 •2株杂交瘤细胞,T-25细胞培养瓶1瓶 •1株细胞Protein A/G纯化抗体2mg •完整的技术服务报告 •抗体验收标准:免疫原检测抗体效价 >1:50000上一篇:多克隆抗体制备服务|实验技术服务下一篇:多肽合成|实验技术服务
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