關鍵詞:多克隆抗體制備技術服務|實驗技術服務 簡介:世界**品牌多克隆抗體制備技術服務|實驗技術服務原裝**,質量保證,價格優惠。 多克隆抗體制備技術服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。 我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數據真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。 產品品牌:多克隆抗體制備技術服務|實驗技術服務 http://www.shijichina.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html 測序實驗流程: 血清的分離: 如果用三角瓶或平皿盛血,將器皿傾斜放置于37oC烘箱2hr,轉移到4oC沉淀,**天早上用吸管吸取血清。如果用離心管收集,37oC烘箱放置2hr,轉移到4oC沉淀,**天早上離心,10000RCF,10分鐘。在血清中加入 NaN3 至終濃度0.02%,分裝后-20oC保存。 抗血清收獲后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數月至數年內抗體效價無明顯變化。注意避免反復凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。 多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟: 1、制備抗原。 2、選擇實驗動物。 3、動物免疫。 4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。 5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。 6、純化出抗體。 7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。 (一)抗原制備 Ig 是免疫球蛋白,對異種動物而言,是良好的抗原物質。可以刺激異種動物產生抗 Ig 血清, 經適當提取后,產生抗 Ig 抗體,又叫**抗體或抗抗體。在多數的間接標記反應中,均需制備 抗 Ig 抗體。 (二)材料與試劑 1.提取的動物 Ig 2.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑 3.青霉素和鏈霉素 4.實驗動物 兔 5.其它材料及試劑 時間(天) 制備步驟 說明 1 初次免疫 每種抗原免疫5只Balb/c小鼠,抗原與弗氏完全佐劑 14 **次免疫 抗原與水溶性佐劑 21 第三次免疫 抗原與水溶性佐劑 28 血清效價檢測 間接ELISA檢測血清效價,效價達>1:20000;抗血清效價>1:10000再次加強一次,效價<1:10000終止合同 30 加強免疫 單獨抗原 三天后采血(血清做陽性對照),取脾 34 細胞融合 SP2/0骨髓瘤細胞與一只小鼠(ELISA效價較高)的脾細胞融合 44-56 HAT選擇雜交瘤細胞 ELISA效價檢測篩選陽性細胞克隆(一株) 60-70 細胞上清送檢 2ml ELISA陽性細胞上清交客戶檢測,請在接到樣品后1周之內回復 細胞凍存 待客戶檢測結果結束,確認1株細胞株進行后續的腹水制備 制備腹水并純化 接種細胞制備腹水及腹水純化(1株) *終提供 •2株雜交瘤細胞,T-25細胞培養瓶1瓶 •1株細胞Protein A/G純化抗體2mg •完整的技術服務報告 •抗體驗收標準:免疫原檢測抗體效價 >1:50000上一篇:多克隆抗體制備服務|實驗技術服務下一篇:多肽合成|實驗技術服務
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